Это многостраничный вид для печати этого раздела. Нажмите здесь для печати.

Вернуться к обычному режиму просмотра.

5. Выделение и идентификация бактерий

При выделении бактерий из образцов следует руководствоваться правилом: один образец = один изолят. Большее количество изолятов из одного образца нецелесообразно, т.к. приведёт только к дополнительной путанице в данных, как и в случае с большим количеством изолятов из одного хозяйства.

5.1 Методы выделения и идентификации Escherichia coli

Исследования проводят руководствуясь, ГОСТ 30726–2001 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий вида Escherichia coli», ГОСТ 32011–2013 (ISO 16654:2001) «Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения Escherichia coli О157», МУК 4.2.2963–11 «Методические указания по лабораторной диагностике заболеваний, вызываемых Escherichia coli, продуцирующих шига-токсины (STEC-культуры), и обнаружению возбудителей STEC-инфекций в пищевых продуктах», ГОСТ 31708–2012 (ISO 7251:2005) «Микробиология пищевых продуктов и кормов. Метод обнаружения и определения количества презумптивных бактерий Escherichia coli. Метод наиболее вероятного числа», ГОСТ 31878–2012 «Корма для животных. Метод обнаружения и подсчета бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий). Метод наиболее вероятного числа», ГОСТ 31747–2012 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий)», ГОСТ Р 54374–2011 «Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий)», «Методические указания по лабораторной диагностике колибактериоза (эшерихиоза) сельскохозяйственных животных», утв. ГУВ МСХ и П РБ 17.12.2007 (№ 10–25/1118).

Идентификацию выделенных культур проводят с помощью доступных коммерческих биохимических тест-системы, также может быть использован MALDI-TOF MS.

5.2 Метод выделения и идентификации Salmonella spp.

Исследования проводят, руководствуясь МУ 4.2.2723–10 «Лабораторная диагностика сальмонеллезов, обнаружение сальмонелл в пищевых продуктах и объектах окружающей среды», ГОСТ 31468–2012 «Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Метод выявления сальмонелл», ГОСТ Р 50455–92 (ISO 3565–75) «Мясо и мясные продукты. Обнаружение сальмонелл (арбитражный метод)», ГОСТ 31659–2012 (ISO 6579:2002) «Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Salmonella».

Идентификацию полученных чистых культур микроорганизмов проводят с помощью доступных биохимических тест-систем, а также MALDI-TOF MS.

5.3 Метод выделения и идентификации Campylobacter spp.

Исследования проводят, руководствуясь ГОСТ ISO 10272–1-2013 «Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы обнаружения и подсчета бактерий Campylobacter spp. Часть 1. Метод обнаружения», МУК 4.2.2321–08 «Методы определения бактерий рода Campylobacter в пищевых продуктах». «Методические указания по лабораторной диагностике кампилобактериоза (вибриоза) сельскохозяйственныхживотных», утв. ГУВМСХиПРБ17.06.2008 (№10–1-5/613), МУ «Идентификация микроорганизмов с применением масс-спектрометра Maldi Biotyper microflex при исследовании продовольственного сырья и пищевых продуктов».

Первичные посевы испытуемых проб проводят на обогатительный бульон Болтона. Далее пересевают на селективные среды (агар mCCD, модифицированную среду Мюллер-Хинтона, агар Престона). Инкубирование проводят в микроаэрофильных условиях при температуре 37°С в течение (44±4) ч.

При обнаружении культур, характерных для кампилобактерий, вид Campylobacter идентифицируют с помощью доступных коммерческих биохимических тест-систем и MALDI-TOF MS.

5.4 Метод выделения и идентификации Enterococcus spp.

Исследования проводят руководствуясь, ГОСТ 28566–90 (СТ СЭВ 6646–89) «Продукты пищевые. Метод выявления и определения количества энтерококков», ГОСТ Р 54354–2011 «Мясо и мясные продукты. Общие требования и методы микробиологического анализа», «Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных и птиц», утв. ГУВ МСХ и П РБ 17.12.2007 (№ 10-25/1129).

Идентификацию выделенных культур проводят с помощью доступных коммерческих биохимических тест-систем, а также MALDI-TOF MS.

Методология выделении бактерий представлена также в Руководстве ФАО [12] .